الکالین فسفاتاز یک آنزیم هیدرولاز است که مسئول حذف گروه ­های فسفات از انواع متعددی از مولکول­ها نظیر نوکلئوتیدها، پروتئین­ها و الکالوئیدها می­باشد. این روش در ارزیابی میزان واکنش­های التهابی در بافت­های مختلف مورد استفاده قرار می­گیرد و اساس آن بر پایه تولید رنگ قهوه­ای تیره توسط فسفات کلسیم آزاد شده به واسطه واکنش آنزیمی در حضور نیترات کبالت و سولفید آمونیوم می­باشد. از آنجا که فرایند ثبوت و پاساژ بافتی موجب آسیب به این آنزیم می­گردد مطالعه فعالیت آنزیم الکالین فسفاتاز بر روی برش­های انجمادی تهیه شده از نمونه­های بافتی تازه صورت پذیرفت (Bakst et al., 2007) .
۲۱-۲) آنالیز و تحلیل داده ­ها
محاسبه آماری با بهره گرفتن از نرم افزار آماری SPSS نسخه ۱۶ انجام شد و برای مقایسه میانگین بین گروه­ ها از آنالیز واریانس یک طرفه و تست تعقیبی Tukey استفاده شد (p<0.05) به عنوان معیار معنی دار بودن اختلاف ها در نظر گرفته شد.
پایان نامه - مقاله
*فصل سوم
نتایج و یافته­ ها
علائم اختصاری بکار برده شده در نمودارهای مربوط به گروه های تحت تیمار
Con: گروه کنترل، Cyc25: گروه سیکلوسپورین روز ۲۵، Cyc45 : گروه سیکلوسپورین روز ۴۵ ، Cyc+GSE25 : گروه سیکلوسپورین + عصاره هسته انگور روز ۲۵، GSE45+Cyc : گروه سیکلوسپورین + عصاره هسته انگور روز ۴۵،Cyc+ HE25: گروه سیکلوسپورین+ عصاره زالزالک روز ۲۵،: Cyc+ HE45 گروه سیکلوسپورین + عصاره زالزالک روز ۴۵
۱-۳) نتایج حاصل از پارامترهای مختلف اسپرم
۱-۱-۳) نتایج حاصل از شمارش اسپرم در اپی­دیدیم
طبق نمودار( ۱-۳ ) تعداد اسپرم­های اپی­دیدیمی در گروه ­های تحت تیمار با سیکلوسپورین­آ در روزهای ۲۵ و ۴۵ به طور معنی داری در سطح p<0.05 نسبت به گروه کنترل کاهش یافت. در گروه­هایی که عصاره زالزالک و عصاره هسته انگور را بمدت ۲۵ روز دریافت کردند تعداد اسپرم­های ایجاد شده تا حدی بهبود حاصل کرد به طوری که دارای تفاوت معنی­دار با گروهی که بمدت ۴۵ روز سیکلوسپورین­آ را دریافت کردند بود ولی با گروه سیکلوسپورین ۲۵ اختلاف آماری معنی­داری نداشتند. در گروه ­های عصاره زالزالک و عصاره هسته انگور روز ۴۵ روند بهبود تا حدی پیشرفت کرد که در پایان روز ۴۵ تفاوت معنی­داری در سطح p<0.05 بین این دو گروه با گروه کنترل نبود.
نمودار۱-۳: مقایسه میانگین تعداد اسپرم در گروه های تحت تیمار
حروف غیریکسان نشان دهنده اختلاف آماری معنی­دار در سطح p<0.05 است.
۲-۱-۳) نتایج حاصل از مطالعه میزان اسپرم زنده
طبق نمودار(­۲-۳) درصد اسپرم­های زنده در گروه تیمار شده با سیکلوسپورین­آ نسبت به گروه کنترل کاهش یافته اما این کاهش در سطح p<0.05 معنی­دار نبوده و با مصرف عصاره زالزالک و عصاره هسته انگور همراه با سیکلوسپورین­آ ، همین مقدار کاهش نیز بهبود یافته است و در روز ۴۵ هیچ گونه اختلاف معنی­داری بین گروه دریافت کننده عصاره زالزالک و عصاره هسته انگور با گروه کنترل در سطح p<0.05 مشاهده نشد(P>0.05).
نمودار۲-۳: مقایسه میانگین درصد اسپرم­های زنده در گروه ­های تحت تیمار
حروف غیریکسان نشان دهنده اختلاف آماری معنی­دار در سطح p<0.05 است.
۳-۱-۳) نتایج حاصل از شمارش اسپرم­های نابالغ
طبق نمودار(۳-۳) درصد اسپرم­های نابالغ در گروهی که بمدت ۴۵ روز سیکلوسپورین­آ دریافت کرده، نسبت به سایر گروه­ ها دارای اختلاف معنی­داری در سطح p<0.05 با گروه کنترل می­باشد. با مصرف عصاره زالزالک و عصاره هسته انگور به عنوان آنتی اکسیدان درصد تولید اسپرم­های نابالغ کاهش یافت ، به طوری که گروه ­های دریافت کننده عصاره زالزالک و عصاره هسته انگور در روز ۲۵و ۴۵ اختلاف معنی­داری در سطح p<0.05 با گروه کنترل ندارند (P>0.05).
نمودار۳-۳: مقایسه میانگین درصد اسپرم­های نابالغ در گروه ­های تحت تیمار
* نشان دهنده اختلاف آماری معنی­دار در سطح p<0.05 است.
۴-۱-۳) نتایج حاصل از مطالعه کروماتین اسپرم
طبق نمودار (۴-۳) درصد اسپرم­های با کروماتین آسیب­دیده در گروهی که سیکلوسپورین آ را بمدت ۲۵ روز دریافت کرده است افزایش یافته اما میزان افزایش نسبت به گروه کنترل در سطح p<0.05 معنی­دار نمی ­باشد اما در گروه سیکلوسپورین­آ روز ۴۵ درصد اسپرم­های با کروماتین آسیب­دیده به طور معنی­داری در سطح p<0.05نسبت به گروه کنترل افزایش یافته است. با مصرف همزمان عصاره زالزالک و عصاره هسته انگور با داروی سیکلوسپورین­آ این درصد کاهش یافته و در نهایت با گروه کنترل دارای اختلاف معنی­داری در سطح p<0.05 نمی ­باشد(P>0.05).
نمودار۴-۳: مقایسه میانگین درصد اسپرم­های با کروماتین آسیب دیده در گروه ­های تحت تیمار
* نشان دهنده اختلاف آماری معنی­دار در سطح p<0.05 است.
تصویر ۱-۳) اسپرم­های رت رنگ آمیزی شده با روش ائوزین نگروزین جهت ارزیابی قابلیت زنده ماندن اسپرم، اسپرم­های زنده (بی رنگ) و اسپرم­های مرده (رنگ گرفته)
تصویر۲-۳) اسپرم­های با مورفولوژی طبیعی رت رنگ­آمیزی شده با روش رنگ آمیزی هماتوکسیلین برای ارزیابی مورفولوژی اسپرم
۲-۳) نتایج حاصل از مطالعه پارامترهای مختلف لقاح (IVF)
۱-۲-۳) نتایج حاصل از تعداد اووسیت­های لقاح یافته در گروه ­های مختلف آزمایش
طبق نمودار (۹-۳) به دنبال تجویز سیکلوسپورین­آ تعداد اووسیت­های لقاح یافته در گروه ­های تحت تیمار که سیکلوسپورین آ را به مدت ۲۵ و ۴۵ روز دریافت کردند کاهش معنی­داری را در سطح p<0.05 نسبت به گروه کنترل نشان می­ دهند. در گروه­هایی که علاوه بر سیکلوسپورین، عصاره هسته انگور را دریافت کردند، در تعداد اووسیت­های لقاح یافته بهبود حاصل شد به طوری که در روزهای ۲۵و۴۵ اختلاف معنی­داری بین این دو گروه و گروه کنترل در سطح p<0.05 وجود نداشت. اما گروهی که علاوه بر سیکلوسپورین، عصاره زالزالک را دریافت کرد بهبودی به میزان کمتری حاصل شد به طوری که در روزهای ۲۵و ۴۵ اختلاف معنی داری بین این گروه و گروه کنترل در سطح p<0.05 مشاهده شد.
نمودار۹-۳: مقایسه میانگین درصد اووسیت­های لقاح یافته در گروه ­های تحت تیمار
حروف غیریکسان نشان دهنده اختلاف آماری معنی­دار در سطح p<0.05 است.
۲-۲-۳) نتایج حاصل از تعداد جنین­های دو­سلولی
طبق نمودار(۱۰-۳) تعداد جنین ۲ سلولی در گروه کنترل دارای تفاوت معنی­دار با گروه ­های تیمار شده با سیکلوسپورین­آ در سطح p<0.05 می­باشد. به طوری که در گروه ­های تحت تیمار تا حد زیادی درصد جنین­های دو سلولی کاهش پیدا کرده است. در گروه­هایی که علاوه بر سیکلوسپورین عصاره هسته انگور و عصاره زالزالک را دریافت کردند روند بهبود بخشی حاصل شد، به طوری که در پایان روز ۴۵ این گروها اختلاف معنی­داری با گروه سیکلوسپورین روز ۴۵ در سطح p<0.05 داشته و با گروه کنترل و سیکلوسپورین روز ۲۵ هیچ گونه اختلاف آماری معنی­داری در سطح p<0.05 نداشته­اند(P>0.05).
.
نمودار ۱۰-۳: مقایسه میانگین درصد جنین­های دو­سلولی در گروه ­های تحت تیمار
حروف غیریکسان نشان دهنده اختلاف آماری معنی­دار در سطح p<0.05 است
۳-۲-۳) نتایج حاصل از تعداد بلاستوسیست
طبق نمودار (۱۱-۳ ) تعداد بلاستوسیست­ها در گروه ­های تحت تیمار با سیکلوسپورین در روزهای ۲۵ و ۴۵ دارای اختلاف معنی­داری با گروه کنترل در سطح p<0.05 است به طوری که در این گروه­ ها درصد بلاستوسیست­ها تا حد زیادی کاهش یافته است. در گروه ­های تحت تیمار که همراه با سیکلوسپورین­آ عصاره زالزالک و عصاره هسته انگور را دریافت کردند ، این پارامتر بهبود یافت به طوری که این گروه­ ها دارای اختلاف معنی­داری با گروه سیکلوسپورین می­باشند ، درحالی که هیچ گونه اختلاف آماری معنی داری با گروه کنترل در سطح p<0.05 ندارند(P>0.05).
نمودار ۱۱-۳: مقایسه میانگین درصد بلاستوسیست­ها در گروه ­های تحت تیمار
حروف غیریکسان نشان دهنده اختلاف آماری معنی­دار در سطح p<0.05 است.
۴-۲-۳) نتایج حاصل از تعداد جنین­های ارست شده
طبق نمودار( ۱۲-۳ ) درصد جنین ارست شده در گروهی که به مدت ۲۵ روز داروی سیکلوسپورین را دریافت کرده است دارای تفاوت معنی­داری با گروه کنترل در سطح p<0.05 نمی ­باشد. اما با ادامه تیمار، درصد جنین­های ارست شده در گروه سیکلوسپورین روز ۴۵ اختلاف معنی­داری در سطح p<0.05با گروه کنترل نشان می­ دهند. همچنین در گروه ­های سیکلوسپورین + عصاره هسته انگور ، در روزهای ۲۵ و ۴۵ اختلاف معنی­داری در درصد جنین­های ارست شده با گروه کنترل مشاهده نشد. و در گروه سیکلوسپورین + عصاره زالزالک در روز ۲۵ تعداد جنین­های ارست شده نسبت به گروه کنترل افزایش قابل ملاحظه ای را نشان داد اما با ادامه تیمار در روز ۴۵ درصد جنین های ارست شده کاهش یافت طوری که اختلاف معنی­داری در سطح p<0.05 بین این گروه وگروه کنترل مشاهده نشد (P>0.05).
.
نمودار۱۲-۳: مقایسه میانگین درصد جنین­های ارست شده در گروه ­های تحت تیمار
* نشان دهنده اختلاف آماری معنی­دار در سطح p<0.05 است.
۵-۲-۳) نتایج حاصل از تعداد جنین­های تیپ ۱
طبق نمودار( ۱۳-۳ ) درصد جنین تیپ ۱ (جنین­هایی با کیفیت بد) در گروهی که به مدت ۲۵ روز داروی سیکلوسپورین را دریافت کرده­است دارای تفاوت معنی­داری با گروه کنترل نمی ­باشد. اما با ادامه تیمار در گروه­هایی که سیکلوسپورین را به مدت ۴۵ روز دریافت کرده ­اند به طور قابل ملاحظه­ای افزایش یافت و دارای تفاوت معنی­دار با گروه کنترل در سطح p<0.05 می­باشند . در گروه­هایی که علاوه بر سیکلوسپورین عصاره زالزالک و عصاره هسته انگور را دریافت کرده اند در روز ۲۵ به مقدار کمی بهبودی حاصل شد، طوری که بین گروه ­های روز ۲۵ و کنترل اختلاف معنی­دار در سطح p<0.05 مشاهده شد. اما با ادامه تیمار با عصاره هسته انگور و زالزالک در روز ۴۵ بهبودی زیاد حاصل شد و بین گروه ­های روز ۴۵ و کنترل اختلاف معنی­داری در سطح p<0.05 وجود نداشت(P>0.05).
نمودار۱۳-۳: مقایسه میانگین درصد جنین­های تیپ ۱ در گروه ­های تحت تیمار
حروف غیریکسان نشان دهنده اختلاف آماری معنی­دار در سطح p<0.05 است.
۶-۲-۳) نتایج حاصل از جنین­های تیپ ۲
طبق نمودار (۱۴-۳) درصد جنین­های تیپ۲ (جنین هایی با کیفیت متوسط) در گروهی که سیکلوسپورین آ را دریافت کرده است (روزهای ۲۵ و ۴۵) افزایش یافته است ، به طوری که دارای تفاوت معنی­دار با گروه کنترل در سطح p<0.05 می باشند. با مصرف عصاره زالزالک و عصاره هسته انگور تعداد جنین­ها کاهش می­یابد و در روز ۲۵ و ۴۵ دارای اختلاف آماری معنی­دار در سطح p<0.05 با گروه کنترل نمی­باشند(P>0.05).
نمودار۱۴-۳ : مقایسه میانگین درصد جنین­های تیپ ۲ در گروه ­های تحت تیمار
* نشان دهنده اختلاف آماری معنی­دار در سطح p<0.05 است.
۶-۲-۳) تنایج حاصل از تعداد جنین­های تیپ ۳
طبق نمودار (۱۵-۳) گروه­هایی که سیکلوسپورین­آ را به مدت ۲۵ و ۴۵ روز دریافت کردند کاهش معنی­داری در درصد جنین­های تیپ ۳ (جنین­های با کیفیت خوب) را نشان داده­اند و با گروه کنترل دارای اختلاف آماری معنی­داری در سطح p<0.05 می­باشند. استفاده از عصاره هسته انگور و عصاره زالزالک باعث بروز روند بهبود بخش در این نوع جنین­ها شده به طوری که در روز ۴۵ هیچ گونه اختلاف آماری معنی­داری در سطح p<0.05 بین گروه های سیکلوسپورین + زالزالک و سیکلوسپورین + عصاره هسته انگور روز ۴۵ با گروه کنترل وجود نداشت(P>0.05).
نمودار۱۵-۳: مقایسه جنین­های تیپ ۳ در گروه ­های تحت تیمار
حروف غیریکسان نشان دهنده اختلاف آماری معنی­دار در سطح p<0.05 است.
تصویر ۳-۳) اووسیت به همراه توده کومولوسی در پیرامون آن (Coc[41]) جهت انجام پروسه IVF

موضوعات: بدون موضوع  لینک ثابت


فرم در حال بارگذاری ...